Dentystyka i ortodoncja
Dobra ortodoncja – podstawy

Nabyta oporność na kryzotynib z mutacji w CD74-ROS1 AD 6

Posted in Uncategorized  by admin
April 18th, 2018

Transfekowane komórki traktowano następnie wzrastającymi dawkami inhibitorów kinazy tyrozynowej. Chociaż kryzotynib i TAE68414 (figura 3B) hamowały fosforylację nie zmutowanego CD74-ROS1 w sposób zależny od dawki, przy wartościach IC50 (pół-maksymalne stężenie hamujące) odpowiednio około 30 nM i 50 nM (Fig. S3 w dodatkowym dodatku ), były nieskuteczne wobec mutanta G2032R, dla którego wartości IC50 dla obu związków były większe niż 1000 nM. Nie obserwowaliśmy aktywności selektywnego inhibitora ALK CH542480215 przeciwko zmutowanej lub niezmutowanej formie CD74-ROS1 (ryc. S4 w dodatkowym dodatku). Testy enzymatyczne in vitro wykazały również, że stężenie krizotynibu potrzebne do osiągnięcia 50% hamowania enzymu (apozycja K i) zostało zwiększone o czynnik 270 dla zmutowanej kinazy G2032R w porównaniu z niezmutowanym ROS1 (K i app 570 . 29 nM vs. K i app 2,1 . 0,1 nM) (Figura 3C). Ponadto, stężenie ATP potrzebne do osiągnięcia połowy maksymalnej prędkości enzymu (Km app) dla mutanta G2032R zostało zmniejszone o współczynnik 3 w porównaniu z niezmutowanym ROS1 (K m app 22 .M vs. K m app 65 .M) (Ryc. S5 w dodatku uzupełniającym) – być może przyczyniając się do zwiększonej aktywności zmutowanej kinazy. Jednak w testach na miękkim agarze zdolności transformacyjne nie zmutowanego i zmutowanego CD74-ROS1 były podobne (Fig.
Aby objaśnić podstawy molekularne oporności, w której pośredniczy G2032R, określiliśmy strukturę krystaliczną fosforylowanej niemodyfikowanej domeny kinazy ROS1 związanej z kryzotynibem (Figura 3D po lewej stronie). Podobnie jak ALK i c-MET (znany również jako receptor czynnika wzrostowego hepatocytów), ROS1 wiąże kryzotynib w miejscu wiązania ATP w szczelinie między N-końcową i C-końcową domeną kinazy.20 Reszta G2032 znajduje się w front rozpuszczalnika w dalszym końcu zawiasu kinazy i tworzy zwoj, ustawiając węgiel G2032 alfa w pozycji, aby zaangażował się w interakcję van der Waalsa z pierścieniem pirazolowym kryzotynibu. Arginina w pozycji 2032 została zamodelowana do pustego miejsca wiązania inhibitora ATP ROS1 (Figura 3D) i uważa się, że sterycznie koliduje z pierścieniem piperydynowym kryzotynibu, a jednocześnie pozwala na wiązanie ATP (Fig. Dane te dostarczają biochemicznych i strukturalnych podstaw odporności na kryzotynib nadawanej przez mutację G2032R.
Dyskusja
W tym badaniu podajemy nabytą mutację oporności na krizotynib w raku wywoływanym przez onkogenną fuzję ROS1. Prezentujemy również strukturę krystaliczną kryzotynibu związanego z domeną kinazy ROS1. W odróżnieniu od klasycznych mutacji gatekeeperów dla oporności na lek, które zidentyfikowano w ABL, 21 EGFR, 22 i ALK, 14 mutacja R20 G2032R jest zlokalizowana w przedniej części domeny kinazy i jest analogiczna do mutacji G1202R ALK zidentyfikowanej w opornym na krizotynib. Nowotwory rytmu płuca ALK15 (ryc
[patrz też: stomatolog Warszawa, oprogramowanie stomatologiczne, Stomatolog Kraków ]

Tags: , ,

Comments are closed.

Powiązane tematy z artykułem: oprogramowanie stomatologiczne Stomatolog Kraków stomatolog Warszawa