Dentystyka i ortodoncja
Dobra ortodoncja – podstawy

Nabyta oporność na kryzotynib z mutacji w CD74-ROS1 AD 5

Posted in Uncategorized  by admin
April 18th, 2018

Sekwencjonowanie eksonowe panelu 409 genów zaangażowanych w karcynogenezę niezależnie potwierdziło obecność mutacji G2032R w nowotworach, które były oporne na leczenie, a także zidentyfikowało mutacje w trzech innych genach – TP53, zmutowanej ataksji-teleangiektazji (ATM) i NOTCH2 – w obu wstępne leczenie i próbki nowotworu oporne na krizotynib, ale nie w prawidłowej tkance (ryc. S2 w dodatku uzupełniającym). Nie wykryto mutacji w EGFR lub KRAS w sekwencjonowaniu egzonów. Molekularne podstawy oporności na krizotynib
Figura 3. Figura 3. Mutacja wysoce konserwowanej glicyny w pozycji 2032 na argininie i oporność na kryzotynib poprzez steryczne interferencje z wiązaniem leku. W panelu A, dopasowania sekwencji aminokwasów pokazują, że G2032 (czerwona gwiazdka) jest wysoce konserwatywny wśród wszystkich 13 paralogów ROS1 i wielu innych klinicznie ważnych kinaz tyrozynowych i seryno-treoninowych. Identyczne reszty zaznaczono na czarno, a konserwatywne substytucje zaznaczono kolorem szarym. Panel B pokazuje wyniki przejściowej transfekcji komórek 293T plazmidami ekspresyjnymi zawierającymi albo niezmutowany CD74ROS1 albo G2032R CD74ROS1. Transfekowane komórki traktowano wzrastającymi stężeniami kryzotynibu (u góry) lub TAE684 (u dołu) przez 6 godzin. Przygotowano lizaty i przeprowadzono analizy Western blot przy użyciu wskazanych przeciwciał. Komórki 293T również transfekowano wyrażającym plazmidy zielonym białkiem fluorescencyjnym jako kontrolą negatywną. GAPDH oznacza dehydrogenazę gliceraldehydo-3-fosforanową. W panelu C, testy enzymatyczne in vitro wykazują znaczny spadek zdolności kryzotynibu do hamowania aktywności kinazy dla mutanta G2032R ROS1 w porównaniu z nie-mutantem. Vi i Vo to początkowe szybkości reakcji odpowiednio w obecności i przy braku kryzotynibu. Panel D pokazuje strukturę krystaliczną kryzotynibu związanego z nieumotywną domeną kinazy ROS1 (po lewej) i model mutanta G2032R (po prawej), w którym istnieje przewidywane zderzenie steryczne z kryzotynibem. W tym schemacie barwienia atomów węgiel ROS1 jest zielony, kryzotynib węglowy fioletowy, tlen czerwony, błękit azotowy, złoto chloru i brąz fluorowy. Dla podkreślenia, pozostałość 2032 jest pokazana w wypełniającej przestrzeń reprezentacji. Czerwone gwiazdki oznaczają resztę strażnika L2026 w ROS1.
Glicyna w pozycji 2032 jest zachowana we wszystkich ludzkich paralogach ROS1 i w kilku innych, bardziej odległych kinazach tyrozynowych i seryno-treoninowych (Figura 3A). W celu określenia, czy podstawienie argininy przy tej wysoce konserwatywnej reszcie nadawało oporność na inhibitory ROS1, transfekowaliśmy komórki 293T plazmidem ekspresyjnym kodującym niezmutowane lub G2032R CD74ROS1.
[hasła pokrewne: stomatolog Warszawa, anatomia palpacyjna, designerskie wieszaki ]

Tags: , ,

Comments are closed.

Powiązane tematy z artykułem: anatomia palpacyjna designerskie wieszaki stomatolog Warszawa